Cre工具鼠的构建方法有哪些?有何作用?
在小鼠模型中,Cre鼠是一种转基因小鼠模型,它携带着一种特定的转基因CRE重组酶基因。而CRE重组酶是一种酶,它能够识别和切割DNA上的特定序列,进而触发基因的重组。那么,Cre工具鼠的构建方法有哪些?有何作用?下面就让小编来为大家介绍下:据了解,研究人员通过使用CRE小鼠和其他携带了CRE识别序列的转基因小鼠,可以实现特定基因在特定组织或时间点的剔除或表达,从而研究该基因在机体发育和功能中的作用。
Cre工具鼠的构建方法主要包括:
1、质粒表达载体 Cre 鼠模型:通过受精卵原核注射的方法,获得 Cre 随机插入基因组的转基因小鼠。
2、定点敲入 Cre 鼠模型:利用 CRISPR/Cas 技术将 Cre 基因定点敲入相关内源基因位点,依靠内源性基因调控序列确定 Cre 表达特征。
3、BAC 转基因 Cre 鼠模型:将 Cre 基因先敲入至 BAC 克隆的特定基因调控元件序列后,构建 BAC 克隆载体,并将此 BAC 载体进行受精卵原核注射法,构建 BAC 转基因 Cre 小鼠模型。虽然该转基因技术也是随机整合插入,但其具有降低了质粒 DNA 随机插入引起的位置效应影响,避免了 Cre 基因 5端敲入可能引起的杂合缺失有表型等方面的优势。
4、安全位点敲入 Cre 小鼠模型:为了避免基因随机插入可能导致诸多不利因素影响(比如表达位置影响作用及插入突变等),通过将 Cre 定点敲入到所谓的「安全」 位点,比如 Rosa26、Hprt 和 Hipp 11 等位点。其中以 Rosa26 位点最为常用。
关于Cre工具鼠的构建方法,小编就先为大家介绍到这里。集萃药康所推出的Cre鼠模型可应用于生命科学和医学各个领域的基因功能研究;不同基因的时空特异性基因表达标记等。用户若有此需求,可通过集萃药康的官网来进一步了解。
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